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磷脂酰膽堿的高效液相色譜HPLC檢測方案
[磷脂酰膽堿]
磷脂酰膽堿是一種兩性分子,由親水的頭部和疏水的尾部組成。亦稱卵磷脂。磷脂酰膽堿是磷脂的主要成分之一,從植物中提取的,磷脂酰膽堿將大腦的指令迅速傳遞,信息傳遞速度越快,記憶力越強,是健腦食物。它能增強嬰兒智力,提高學(xué)習(xí)效率。尤其是胎兒,在生長發(fā)育中對磷脂酰膽堿的需求極大。
以下是賽智科技利用LC-10Tvp高效液相色譜儀對磷脂酰膽堿進行的HPLC檢測方案。
1、儀器與試劑
1.1儀器、設(shè)備
LC-10Tvp高效液相色譜儀
Sepax?HP-Silica?色譜柱:250mm×4.6mm×5μm
分析天平
恒溫箱,溫度控制在100±1℃
微量進樣器,(100μL)一支
漩渦混勻器
針頭過濾器
微孔濾膜:0.45μm
1.2試劑
甲醇:色譜純。
異丙醇:色譜純。
正己烷,色譜純。
冰醋酸:分析純。
三乙胺:分析純
去離子水
磷脂酰膽堿標準液
2、供試品溶液和對照品溶液的制備
對照品儲備液的制備: 精密稱取磷脂酰膽堿標準品0.05g(精確至0.0001g),置于50ml容量瓶中,加甲醇與三氯甲烷的混合溶液溶解并稀釋至刻度,配成1mg/mL的磷脂酰膽堿標準儲備液,置-6℃下冷藏。
標準曲線系列濃度配置:朱雀吸取上述儲備液各1mL、2mL、4mL、8mL,分別置于10mL容量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,配成濃度分別為0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL及0.8mg/mL的磷脂酰膽堿溶液,用0.45um微孔濾膜過濾,待用。
供試品溶液的制備: 根據(jù)樣品中磷脂酰膽堿的含量,準確稱取試樣10mg~50mg,用流動相溶解,超聲處理15min,并用流動相稀釋至10ml。
3、色譜條件
Silica色譜柱:4. 6 mmx250 mm,粒度5 μm
流動相:
流動相A:甲醇:水:冰醋酸:三乙胺 = 85:15:0.45:0.05
流動相B:正己烷:異丙醇:A = 10: 40: 50
波長:205nm
流速:1. 0 mL/min
柱溫:40℃
4、測定法
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀,測定,即得
5、譜圖
標準品譜圖
樣品譜圖
儀器配置
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